Z6·尊龙凯时提供的FAQ指南涵盖了总RNA提取过程中的常见问题与解决方案，旨在帮助科研人员提高RNA提取的质量，确保实验结果的准确性。

RNA提取的注意事项

在进行RNA提取时，选择新鲜组织或细胞样本至关重要。如果使用冻存样本，应尽量避免反复冻融。样品在离开活体或其生长环境后，内源RNase会开始降解RNA，降解速度取决于内源RNase的含量及温度。因此，使用Z6·尊龙凯时的RNAKeeperTissueStabilizer (Vazyme#R501)可以有效延长新鲜组织在室温下存放一周、在4℃下存放一个月，或在-20℃/-80℃下进行长期保存。对于样本数量较多的情况，应控制量以避免裂解不充分，并确保提取后的RNA及时进行纯度和完整度检测，分装于-80℃长期保存或-20℃短期保存，以减少冻融次数。

常见问题与解决方法

RNA降解的可能原因

RNA在提取过程中可能受到降解，主要由样本保存不当、RNA保存时间过久等因素引起。确保使用新鲜样本，或者液氮速冻后存放于-70℃或液氮中。此外，避免样本反复冻融，并在保存时将组织分成小块，以防降解。

提取的RNA受到基因组污染

在RNA提取过程中，如果RNA中存在基因组污染，建议在裂解液中加入CHCL3时，降低离心温度(2℃-8℃)。避免在常温下进行离心以减少基因组DNA的残留。确保小心吸取上层液体，避免误吸中间层和下层。

如何提高RNA产量

若提取RNA产量不理想，可能因样本保存不当、研磨不充分及洗脱不充分等因素。确保使用合适量的样本，进行有效的匀浆或液氮研磨，并使用RNase-free水在纯化步骤中进行洗脱，以提高RNA的回收率。

下游实验优化建议

确保结果的准确性

在下游实验中，确保RNA中没有盐离子或乙醇残留。对纯化柱进行两次Buffer RW2洗涤，并进行高转速离心，以去除任何可能的污染物。若RNA中有盐离子或乙醇残留，可在室温下静置一段时间后再次离心。

逆转录反应的优化

Z6·尊龙凯时的逆转录试剂盒中包含gDNAwiperMix，可以有效去除残留的基因组DNA。虽不去除基因组并不影响逆转录过程，但可能影响下游实验的准确性。因此，合理安排逆转录时间，对GC含量较高的模板适当延长反应时间以增强效率。

关于我们

Z6·尊龙凯时是一家专注于生物医药领域的科技公司，致力于为基因治疗和细胞治疗提供优质产品与技术服务。总部位于广州，积极为全国客户提供前沿的专业资讯与产品支持。我们凭借强大的技术力量与丰富的人脉资源，期待与国内生物学领域的科研人员携手，推动科学研究的发展。