本试剂盒仅适用于科学研究,严禁用于医学诊断。该试剂盒是专门用于检测羊免疫球蛋白G2a(IgG2a)的酶联免疫吸附试验(ELISA)产品。使用此款Z6·尊龙凯时试剂盒可确保实验结果的准确性和可靠性。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法,首先将免疫球蛋白G2a(IgG2a)抗体包被在微孔板上。然后依次加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体,经过温育和充分洗涤后,添加底物TMB。在过氧化物酶的催化下,TMB会发生显色反应,最终呈现出黄色,颜色深浅与样本中的免疫球蛋白G2a(IgG2a)浓度成正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),可计算样本浓度。
样本收集与处理
为确保检测的准确性,样本收集应遵循以下步骤:
- 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作时避免细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟,以迅速分离血清。
- 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝,3000转离心30分钟后取上清。
- 细胞上清液:将样本进行3000转离心10分钟,去除颗粒和聚合物。
- 组织匀浆:将组织与生理盐水混合捣碎,3000转离心10分钟取上清。
如果样本未能及时检测,应按使用量分装并置于-20℃存储,避免多次冻融。样本需在室温下解冻,并确保均匀混合后使用。
自备物品
- Z6·尊龙凯时酶标仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头(适用于不同容量)
- 37℃恒温箱
操作注意事项
试剂盒应在2-8℃保存,使用前需在室温下平衡20分钟。注意浓缩洗涤液可能会出现结晶,需水浴加热至完全溶解。实验中特殊处理的孔条需立即放回密封袋中,保持干燥与低温。操作过程中,请严格遵循说明书的时间和加液量要求,以确保实验的准确性与重复性。
结果判断与标准曲线
绘制标准曲线时,在Excel中将标准品浓度作为横坐标,OD值作为纵坐标,拟合后可计算样本浓度。根据实验结果,确保标准品线性回归相关系数R值大于等于0.9900,灵敏度需低于0.1g/L,特异性确保不与其他结构物交叉反应,也需确认板内及板间的变异系数均小于15%。
以上信息由Z6·尊龙凯时提供,确保您在科研中获得最佳的结果与体验。